胰蛋白酶切割胰島素原生成胰島素，在胰島素的生產(chǎn)中發(fā)揮著重要作用，以豬源胰蛋白酶基因為模板，克隆擴增胰蛋白酶原(TgM)基因，可將其轉化大腸桿菌，構建含TgM基因的工程菌株并誘導表達；菌液在經(jīng)過高壓均質機的破碎，收集破碎后的菌液，經(jīng)過對其提純后可得到胰蛋白酶原液，可用于后續(xù)酶活測定等試驗。

　　此次實驗研究菌體的破碎使用的是高壓均質機，它可將工程菌株破碎率有效提升，獲得較高濃度的蛋白溶液。

　　實驗設備：高壓均質機 GSL-5

　　高壓均質機對大腸桿菌破碎處理的實驗步驟：

　　1.準備高壓均質機GSL-5（定制17ml處理量帶在線排氣）1臺、標配款冷水機1臺。

　　2.收集大腸桿菌樣品進行儀器上機前處理。

　　3.清洗儀器，倒入處理后的大腸桿菌樣品；壓力調大800-1000bar處理3-4遍。

　　4.壓力歸零，收集均質后的樣品。

　　大腸桿菌樣品均質處理前后的實驗效果圖：

　　在實驗獲得高濃度的蛋白溶液后，可用紫外分光光度法檢測酶活力，并將純化獲得的突變胰蛋白酶用于后續(xù)與胰島素原相關實驗。

　　高壓均質機是一款利用高壓泵將物料加壓至一定壓力后，通過均質閥的狹窄縫隙，使物料在高壓下受到剪切、沖擊和空穴效應等作用，從而達到均質、乳化和破碎等目的的設備，具有壓力高、體積小、操作便捷、處理效率高等特點，廣泛應用于制藥、生物工程、食品、精細化工等領域。