白血病是一類造血干細胞惡性克隆性疾病,是由于造血干細胞發(fā)生惡變,抑制了正常血細胞的生成。藥物研究所,通過制備白細胞腫瘤的單細胞懸液,進行流式實驗分析,深入了解腫瘤細胞的增殖、凋亡和免疫表型等特征,能夠更加精準地篩選有效的治療藥物,開發(fā)創(chuàng)新的治療方法,為白血病患者帶來更多的生存希望。
小鼠皮下瘤單細胞制備上流式實驗如下:
實驗?zāi)康模?/strong>將MV4-11急性髓系白血病細胞接種到裸鼠背部皮膚上,形成皮下瘤,2-3周后腫瘤大小生長至1-1.5cm左右,可以進行單細胞懸液制備,然后進行流式分析。
實驗設(shè)備:單細胞懸液制備儀JX-CKSM-4WK
樣品準備:單細胞制備儀一臺,接種MV4-11急性髓系白血病細胞的裸鼠一只、40um細胞篩、離心管、低溫水平離心機、消化酶試劑盒等
單細胞懸液制備的實驗步驟:
1.將接種MV4-11急性髓系白血病細胞的裸鼠斷頸處死,取下腫瘤。
2.待腫瘤剝離完畢后,將腫瘤轉(zhuǎn)移至加入預(yù)冷1640基礎(chǔ)培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中,用眼科剪將腫瘤組織剪碎。
3.將剪碎的腫瘤組織轉(zhuǎn)移至儀器配套的消化管,加入配套的消化酶,放入儀器中,選擇對應(yīng)的程序進行制備。
4.下機后加入終止液,用40um的細胞篩(或200目紗布)過濾,過濾后放入離心機離心。
5.離心后棄上清,用緩沖液重懸細胞,并調(diào)整細胞濃度至1x107/mL。實驗樣品圖
腫瘤組織樣品細胞懸液制備前后的實驗效果:
制備好的單細胞懸液進行染色,染色后上流式,對細胞的免疫表型特征進行詳細分析,確定細胞的類型和分化狀態(tài)。更精準地認識 MV4 - 11 細胞,對白血病的診斷、治療以及發(fā)病機制進行探究。
單細胞懸液制備儀是一種集成金屬浴消化與溫和剪切組織的新一代單細胞細胞懸液制備設(shè)備,應(yīng)用于流式細胞術(shù)/單細胞測序/原代細胞培養(yǎng)等實驗,具有起始組織量小,時間短,細胞得率高,細胞活性高的特點。采用國際DIN方法設(shè)計,低噪音,使用方便,性能穩(wěn)定,對樣品的消化處理過程始終處在恒溫狀態(tài)。