實驗研究方向：此次實驗以小鼠皮膚為樣本；由于小鼠皮膚組織內(nèi)含有較多的免疫細胞，為了更好的對免疫與炎癥的基礎研究、腫瘤免疫治療轉(zhuǎn)化應用研究、醫(yī)學科學發(fā)展戰(zhàn)略研究，此次實驗我們選用上海凈信科研者的單細胞懸液制備儀，利用消化后得到單細胞懸液，用于后期做流式細胞分析。

　　小鼠皮膚單細胞懸液制備的實驗步驟：

　　1.組織獲?。喝⌒∈笠恢?，麻醉致死，取皮膚150mg組織，置于無菌裝有4℃完全培養(yǎng)液的培養(yǎng)皿中，將培養(yǎng)皿置入冰盒子快速拿回實驗室。將上述組織用含有雙抗的培養(yǎng)液浸泡漂洗20分鐘，并用無血清培養(yǎng)液反復沖洗干凈。用眼科剪去除組織塊中的脂肪、神經(jīng)組織、結(jié)締組織和壞死組織）

　　2、酶消化/機械分離：用剪刀將取樣切割成3mm3左右的小塊，加入10倍體積組織量(2ml)并預熱到37℃的組織消化酶，放入37℃單細胞懸液儀，消化30min左右 （內(nèi)置程序選擇），消化完成后，用移液器吹打，加入4ml消化終止液后，70um細胞濾網(wǎng)過濾得細胞懸液

　　3、洗滌和重懸(去紅去酶)：用Ficoll去除紅細胞。分離后的細胞懸液需要離心純化，250-300 g離心10分鐘1次純化

　　小鼠皮膚單細胞懸液制備的實驗結(jié)果：

　　實驗解決的問題：從組織獲得存活單細胞是一個復雜過程，目前市面上組織單細胞化的方法有采用機器處理或者人工處理方法，以上處理方法均存在處理時間長、細胞處于逆境狀態(tài)時間長、 細胞得率低、細胞存活率低、操作繁瑣等問題。

　　溫控型單細胞懸液制備儀JX-CKSM-12WK是一種集成金屬浴消化與溫和剪切組織的新一代細胞懸液制備設備，對樣品的消化處理過程始終處在恒溫狀態(tài)，通過恒溫消化，組織剪切，得到高活率的單細胞懸液。單細胞制備儀具有起始組織量小、時間短、細胞得率高、細胞活性高的性能特點。